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腦立體定位儀實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-01-07   點(diǎn)擊次數(shù):1708次
   腦立體定位儀是一種用于微創(chuàng)操作大腦的方法,通過(guò)腦圖譜和三維坐標(biāo)系可以準(zhǔn)確地定位大腦內(nèi)部的小目標(biāo),并對(duì)其執(zhí)行一些操作,例如消融(切除),活檢,病變,注射,刺激,植入等。哺乳動(dòng)物的大腦是所有器官中最復(fù)雜的一部分,結(jié)構(gòu)上分為很多區(qū)域和核團(tuán),在需要對(duì)某個(gè)特定核團(tuán)進(jìn)行研究的時(shí)候就需要通過(guò)立體定位技術(shù)對(duì)其進(jìn)行精確定位和操作。
  
  在神經(jīng)科學(xué)的研究方法中,為了使各種處理手段(給藥、毀損、病毒注射等)或信號(hào)采集(微電極、探針)到達(dá)目的腦區(qū)的相應(yīng)位置,需要使用腦立體定位技術(shù)。
  
  下面詳細(xì)介紹腦立體定位實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng):
  1、首先根據(jù)以上的注意事項(xiàng)找準(zhǔn)腦立體定位點(diǎn)。
  
  2、熒光、有色染料預(yù)實(shí)驗(yàn):在病毒注射之前,為了確定核團(tuán)定位是否正確,推薦神經(jīng)順行示蹤的DiI染料于注射后1周,神經(jīng)逆行示蹤的熒光金(Flourogold)染料于注射后2周切片,并對(duì)照?qǐng)D譜確認(rèn)注射的核團(tuán)位點(diǎn)無(wú)誤,再進(jìn)行病毒注射,可有效提高病毒標(biāo)記的成功率。冰凍切片時(shí)注意,先從所要核團(tuán)外開始切(還不到核團(tuán)所在層面),拿到的切片對(duì)照?qǐng)D譜中的一些參照物來(lái)判斷核團(tuán)是否準(zhǔn)確(對(duì)照物可選大而清晰的海馬、視交叉,腦室、核團(tuán)附近的特殊結(jié)構(gòu)如纖維索等等),切片同時(shí)注意調(diào)節(jié)凍臺(tái)角度,使切片角度與圖譜一致。
  
  3、注意小鼠的狀態(tài):由于俯臥體位以及腦立體定位儀的夾持,容易造成小鼠窒息死亡,因此需要隨時(shí)確認(rèn)小鼠氣道通暢。另外,對(duì)于手術(shù)切開的部位,應(yīng)適當(dāng)?shù)渭由睇}水,防止傷口干燥。
  
  4、大鼠顱骨水平位定位操作:定位時(shí)將大鼠固定成顱骨水平位后,先定位到前囟,以前囟為原點(diǎn),向前或向后、向左或向右、向下(先在顱骨上打孔)到達(dá)核團(tuán)位置,需要強(qiáng)調(diào)的是,坐標(biāo)是以前囟為原點(diǎn),而不是以鉆孔后的腦表面為原點(diǎn)。
  
  5、熟能生巧:通過(guò)多加練習(xí),最后能根據(jù)所用動(dòng)物的體重對(duì)坐標(biāo)做相應(yīng)的修正,保證一定得準(zhǔn)確率,立體定位也就成功了。

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